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海馬神經元原代培養

簡(jian)要描述:神(shen)經(jing)元(yuan)原(yuan)代培(pei)(pei)(pei)養是將(jiang)胚胎哺乳動物中(zhong)樞神(shen)經(jing)系統的(de)部(bu)分組織(zhi),如大(da)腦皮層、海(hai)馬、脊髓等腦組織(zhi)直(zhi)接(jie)取出(chu),再接(jie)種培(pei)(pei)(pei)養的(de)方(fang)(fang)法(fa)。目前國(guo)內、外有關(guan)神(shen)經(jing)元(yuan)培(pei)(pei)(pei)養的(de)方(fang)(fang)法(fa)較(jiao)多,但在(zai)原(yuan)代培(pei)(pei)(pei)養中(zhong)神(shen)經(jing)元(yuan)的(de)純度(du)和產量方(fang)(fang)面還存在(zai)一些急待(dai)解(jie)決的(de)問題。由于神(shen)經(jing)元(yuan)是一種高度(du)分化(hua)的(de)細(xi)胞(bao),相對(dui)于其它(ta)細(xi)胞(bao)而(er)言,神(shen)經(jing)元(yuan)在(zai)體(ti)外更(geng)難以存活和生長(chang)。因此,體(ti)外培(pei)(pei)(pei)養神(shen)經(jing)元(yuan)要求的(de)培(pei)(pei)(pei)養方(fang)(fang)法(fa)和營(ying)養條件(jian)均較(jiao)為特殊。

  • 更新時間:2023-10-30
  • 廠(chang)商性質:代理商
  • 訪(fang)  問  量(liang):2202

詳細介紹

品牌其他品牌產地類別國產
應用領域醫療衛生,環保,食品,化工,生物產業

海馬神經元原代培養細胞實驗

一(yi)、背景

神(shen)(shen)(shen)經元(yuan)原代培養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)是(shi)將(jiang)胚胎哺乳動物中樞(shu)神(shen)(shen)(shen)經系(xi)統(tong)的(de)(de)部分組織,如大腦皮層、海馬、脊髓等(deng)腦組織直接(jie)取出,再接(jie)種(zhong)培養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)的(de)(de)方(fang)(fang)法(fa)(fa)。目前國內、外有關神(shen)(shen)(shen)經元(yuan)培養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)的(de)(de)方(fang)(fang)法(fa)(fa)較(jiao)多,但在原代培養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)中神(shen)(shen)(shen)經元(yuan)的(de)(de)純度(du)和(he)產量方(fang)(fang)面還存(cun)在一(yi)些急待解決的(de)(de)問(wen)題。由于(yu)神(shen)(shen)(shen)經元(yuan)是(shi)一(yi)種(zhong)高度(du)分化的(de)(de)細胞,相對(dui)于(yu)其它(ta)細胞而(er)言(yan),神(shen)(shen)(shen)經元(yuan)在體外更(geng)難以存(cun)活和(he)生長。因此,體外培養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)神(shen)(shen)(shen)經元(yuan)要(yao)求的(de)(de)培養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)方(fang)(fang)法(fa)(fa)和(he)營養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)條件均(jun)較(jiao)為(wei)特殊。


神經細(xi)胞的體(ti)外培養技術是研究神經源性疾病(bing)的發病(bing)機制、進程的一個重要工具,能(neng)很(hen)好的、直觀(guan)的反(fan)映離體(ti)神經元(yuan)的發育狀況和生理(li)活(huo)性,如(ru)何建立一個穩定成熟的神經細胞培養體系是神經系統疾病體外實驗研究順利進行的基礎。隨著基礎醫學及臨床醫學研究的逐漸深入,神經細胞的體外培養技術在腦損傷、神經障礙性疾病、衰老相關神經疾病方面得到廣泛重視和普及應用。


二、海馬神經元原代培養細胞實驗步驟

(1)75% (體積分數)酒精(jing)消(xiao)毒孕(yun)鼠(shu),在無(wu)(wu)菌條件下取出胎(tai)鼠(shu),分離并(bing)去除海馬,置于冷的(de)無(wu)(wu)鈣、鎂的(de)HBSS液的(de)平皿中( 下置冰袋)。

(2)解剖顯微(wei)鏡無菌條件下(xia)仔細(xi)剝(bo)離海馬。

(3)用彈(dan)簧剪(jian)將海馬剪(jian)成1cm3大小(xiao),消化液(ye)37℃消化15-20min,每五分鐘振蕩一次;

(4)去掉上(shang)清(qing),加(jia)入終止(zhi)液終止(zhi)消化,吹打10-15次,不能有氣泡,收(shou)集上(shang)清(qing),剩余組織再消化一次。

(5)4℃1000rpm離心10min,棄(qi)上清,加入種植液1重懸,培養箱內差(cha)速貼壁30min;

(6)收集上清,臺盼藍染(ran)色計數,按6*105cells/孔種(zhong)入六孔板(ban)(種(zhong)植液(ye)1),37℃,5%CO2,95%飽和(he)濕度的培養(yang)箱(xiang)中培養(yang);

(7)培養第二天,全換液(ye)更(geng)換為種植液(ye)2;

(8)培養(yang)第四天(tian),半量換(huan)液加入5uM的(de)阿糖(tang)胞(bao)苷,24h全(quan)量換(huan)液;

(9)之后每周(zhou)換液兩次。




 

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