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脊髓神經元原代培養

簡(jian)要(yao)描述(shu):脊(ji)髓神經(jing)(jing)(jing)元(yuan)(yuan)原代培(pei)養(yang)(yang)是將胚胎哺(bu)乳(ru)動物(wu)中樞神經(jing)(jing)(jing)系統的(de)部分(fen)組織,如大腦(nao)皮層(ceng)、海馬、脊(ji)髓等腦(nao)組織直接取出,再接種培(pei)養(yang)(yang)的(de)方法。目前國內、外有關神經(jing)(jing)(jing)元(yuan)(yuan)培(pei)養(yang)(yang)的(de)方法較多(duo),但在(zai)原代培(pei)養(yang)(yang)中神經(jing)(jing)(jing)元(yuan)(yuan)的(de)純度和(he)(he)產(chan)量方面還存在(zai)一(yi)些急待(dai)解決(jue)的(de)問題。由(you)于(yu)神經(jing)(jing)(jing)元(yuan)(yuan)是一(yi)種高度分(fen)化的(de)細(xi)胞,相(xiang)對于(yu)其它(ta)細(xi)胞而言,神經(jing)(jing)(jing)元(yuan)(yuan)在(zai)體(ti)外更難以存活和(he)(he)生長。因此(ci),體(ti)外培(pei)養(yang)(yang)神經(jing)(jing)(jing)元(yuan)(yuan)要求的(de)培(pei)養(yang)(yang)方法和(he)(he)營養(yang)(yang)條(tiao)件均較為特(te)殊。

  • 更新(xin)時間(jian):2023-10-30
  • 廠(chang)商(shang)性質:代理商
  • 訪  問  量:1999

詳細介紹

品牌其他品牌產地類別國產
應用領域醫療衛生,環保,食品,化工,生物產業

  脊髓神經元原代培養細胞實驗

  一、背景

  神經元(yuan)(yuan)原代培(pei)養(yang)是將胚(pei)胎哺乳動物中(zhong)樞神經系統(tong)的(de)部分組織,如大腦皮(pi)層(ceng)、海馬、脊髓等(deng)腦組織直接取出,再接種培(pei)養(yang)的(de)方法。目前(qian)國內、外(wai)(wai)有關神經元(yuan)(yuan)培(pei)養(yang)的(de)方法較多,但在(zai)原代培(pei)養(yang)中(zhong)神經元(yuan)(yuan)的(de)純度和(he)產量(liang)方面還存(cun)在(zai)一些急(ji)待解決的(de)問題(ti)。由于(yu)神經元(yuan)(yuan)是一種高度分化的(de)細(xi)胞,相對于(yu)其它細(xi)胞而言,神經元(yuan)(yuan)在(zai)體外(wai)(wai)更難以存(cun)活(huo)和(he)生長(chang)。因此,體外(wai)(wai)培(pei)養(yang)神經元(yuan)(yuan)要求的(de)培(pei)養(yang)方法和(he)營養(yang)條(tiao)件均較為(wei)特殊。

  神(shen)(shen)(shen)經(jing)(jing)細胞(bao)的(de)體(ti)外培(pei)養技(ji)術是研(yan)究神(shen)(shen)(shen)經(jing)(jing)源性疾病(bing)的(de)發(fa)病(bing)機制、進(jin)(jin)程的(de)一個重(zhong)要工具,能(neng)很好的(de)、直觀的(de)反映離體(ti)神(shen)(shen)(shen)經(jing)(jing)元的(de)發(fa)育(yu)狀況和生理活性,如(ru)何建立一個穩定(ding)成熟的(de)神(shen)(shen)(shen)經(jing)(jing)細胞(bao)培(pei)養體(ti)系是神(shen)(shen)(shen)經(jing)(jing)系統疾病(bing)體(ti)外實驗研(yan)究順利進(jin)(jin)行的(de)基(ji)礎。隨著基(ji)礎醫學及臨床醫學研(yan)究的(de)逐漸深入,神(shen)(shen)(shen)經(jing)(jing)細胞(bao)的(de)體(ti)外培(pei)養技(ji)術在腦損(sun)傷(shang)、神(shen)(shen)(shen)經(jing)(jing)障(zhang)礙性疾病(bing)、衰(shuai)老相關神(shen)(shen)(shen)經(jing)(jing)疾病(bing)方面得(de)到廣泛重(zhong)視和普及應用。

  二、脊髓神經元原代培養細胞實驗實驗步驟

  (1)75%(體(ti)積分數)酒(jiu)精消毒孕鼠(shu),在(zai)無(wu)菌條件下取出胎鼠(shu),分離并切(qie)取脊髓,置(zhi)于冷的(de)無(wu)鈣、鎂(mei)的(de)HBSS液的(de)平(ping)皿(min)中(下置(zhi)冰袋)。

  (2)解剖顯微鏡(jing)無菌(jun)條件下仔細(xi)剝(bo)離脊膜及血(xue)管(guan)。

  (3)用彈簧剪將脊(ji)髓(sui)剪成1cm3大小,消化液37℃消化15-20min,每(mei)五分(fen)鐘振蕩一次;

  (4)去掉(diao)上(shang)清(qing),加入終(zhong)止液終(zhong)止消化,吹打(da)10-15次,不能有氣泡,收集(ji)上(shang)清(qing),剩余組織再消化一次。

  (5)4℃1000rpm離心10min,棄上清,加入種植液1重懸(xuan),培養箱(xiang)內差速貼壁(bi)30min;

  (6)收集上(shang)清,臺盼(pan)藍(lan)染色計數,按6*105cells/孔(kong)種(zhong)入(ru)六孔(kong)板(種(zhong)植液1),37℃,5%CO2,95%飽和濕度的培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang);

  (7)培養第二天(tian),全換(huan)液更換(huan)為(wei)種植液2;

  (8)培(pei)養第(di)四天,半量換液加入5uM的阿糖胞(bao)苷,24h全量換液;

  (9)之(zhi)后(hou)每周換液兩(liang)次。


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