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細胞染色實驗服務

簡(jian)要描述:細(xi)胞染色實驗服務(wu)是(shi)伊萊(lai)博生物(wu)的基礎服務(wu)項目之(zhi)一(yi),由細(xi)胞平臺經驗豐富的實驗人員操作完(wan)成。

  • 更新時間:2023-10-30
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Hoechst染色:hoechst可以穿過活細胞膜與細胞核結合(主要為凋亡活細胞)在紫外光下將核染為藍色.Hoechst染細胞核會影響共聚焦顯微鏡對該樣本其他熒光的觀察效果.hoechst有hoechest33342和hoechst33258兩種hoechsts33258, hoechst33342二者區別不大,但是hoechst33342對細胞的毒性作用更小一些,所以-般來說hoechsts33258用于細胞固定后再染色,而hoechst33342則可以對活細胞直接進行染色!
PI (Propidium Iodide 碘化丙啶)染色:是一種可對DNA染色的細胞核染色試劑,常用于細胞凋亡檢測.碘化丙啶(Propidium Iodide, PD是- -種核酸染料(紅色),它不能透過完整的細胞膜,但調亡中晚期的細胞和壞死細胞由于細胞膜通透性的增加,PI能夠透過細胞膜而使細胞核染紅.用PI單一染色觀測培養細胞, 只能表示細胞的壞死情況,而不是凋亡( 當然晚期凋亡PI亦可著色)。但是如果您只是想知道細胞的死亡情況,而不是仔細區分壞死或凋亡,那么PI單一染色也可以。但是如果您一定要認定細胞的調亡,那么PI單一染色顯然不夠!
annexin-V染(ran)色(se)細(xi)胞(bao)(bao)凋(diao)(diao)亡早期(qi),細(xi)胞(bao)(bao)膜標(biao)志發生改變其中,磷脂酰(xian)絲氨酸(Annexin-V,PS)外(wai)翻,Annexin-V 在Ca+存在的(de)條件下與其高親和力特異性結合.這樣(yang),Annexin-v染(ran)色(se)陽性,表示細(xi)胞(bao)(bao)處于早期(qi)凋(diao)(diao)亡狀態.Annexin-V結合不(bu)同的(de)熒(ying)光(guang)(guang)抗體,就可(ke)以(yi)利(li)用(yong)流式細(xi)胞(bao)(bao)儀、熒(ying)光(guang)(guang)顯微鏡以(yi)及(ji)共(gong)聚焦激光(guang)(guang)掃描顯微鏡檢測細(xi)胞(bao)(bao)凋(diao)(diao)亡的(de)發生。Annexin V用(yong)FITC標(biao)記發綠色(se)熒(ying)光(guang)(guang);如果(guo)用(yong)PE標(biao)記就發紅色(se)熒(ying)光(guang)(guang)。

 

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